Role of TLR4-TRPC6 in LPS-induced NF-κB P65 expression and nuclear translocation in airway epithelial 16HBE cells

AIM: To investigate the role of Toll-like receptor 4 (TLR4) and transient receptor potential channel 6 (TRPC6) signaling pathway in lipopolysaccharide (LPS)-induced nuclear factor-κB (NF-κB) P65 expression and nuclear translocation in airway epithelial cells (16HBE) for supplementing the mechanism for airway inflammation. METHODS: After stimulating the 16HBE cells with LPS at 1 mg/L for 0, 0.5, 2, 6, 12 and 24 h, the expression of NF-κB P65 at mRNA and protein levels in the 16HBE cells were determined by RT-PCR and Western blot respectively, and the nuclear translocation of NF-κB P65 was detected by immunocytochemical staining method. The effects of TLR4 inhibitor CLI-095 at 5 μmol/L and TRPC6 agonist Hyp9 at 10 μmol/L on LPS (1 mg/L)-induced NF-κB P65 expression and nuclear translocation in the 16HBE cells were determined by RT-PCR, Western blot and immunocytochemical staining. RESULTS: LPS increased the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation in the 16HBE cells(P<0.05). TLR4 inhibitor CLI-095 reduced the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation induced by LPS, while Hyp9 enhanced the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation induced by LPS in the 16HBE cells(P<0.05). CONCLUSION: LPS induces the expression and nuclear translocation of NF-κB P65 in the 16HBE cells via TLR4-TRPC6 signaling pathway.     

茶树蛋白激酶基因CsCIPK的克隆与表达特性分析

以茶树品种‘龙井43’作为材料,利用RT-PCR方法,从茶树的cDNA中克隆得到1个编码蛋白激酶的基因,命名为CsCIPK。序列分析表明,CsCIPK开放阅读框长度为1 341 bp,编码446个氨基酸,蛋白质分子量为414234。蛋白功能域预测和多重对比显示,CsCIPK蛋白含有1个保守的N端激酶结构域和1个相对不保守的C端调节结构域,即丝氨酸/苏氨酸激酶结构域和NAF结构域。理化性质、亲/疏水性、无序化分析显示,CsCIPK属于疏水性蛋白,理论等电点为7.04,有4段无序化区域,其二级结构分析显示主要由α螺旋、不规则卷曲组成。通过实时荧光定量PCR对‘龙井43’和‘安吉白茶’中的CsCIPK表达特性进行分析。结果显示‘龙井43’中CsCIPK的相对表达量在高温、干旱及盐处理4 h、低温处理24 h时达到最高。‘安吉白茶’中CsCIPK的相对表达量在高温及盐处理4 h、低温及干旱处理1h时达到最高。CsCIPK在‘龙井43’的根中,‘安吉白茶’茎中表达量最高。不同浓度的GA和IBA处理‘龙井43’茶苗,结果显示0.2 mmol·L-1 GA处理后,CsCIPK表达量先升高后下降,6 d时处理组为对照组的62倍;0.6 mmol·L-1 IBA处理后,CsCIPK的表达量在3 d时显著高于对照组;不同浓度GA和IBA处理后,9 d时CsCIPK表达量均显著低于对照。     

不同宿主源弓形虫ROP16基因的遗传变异分析

为研究不同分离株弓形虫棒状体蛋白ROP16基因的遗传变异，扩增9种不同来源的弓形虫样品的ROP16基因，并对其序列进行比对及构建进化树的分析。结果表明，弓形虫不同分离株ROP16序列的同源性均在990%以上，但存在限制性位点多态性；用弓形虫ROP16作为PCR-RFLP的标记分子，未能鉴别出传统的弓形虫Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型，却鉴定出一株特殊的猪源弓形虫分离株。弓形虫ROP16基因的株间保守性提示其是一个用于预防弓形虫病的潜在疫苗候选分子，值得对其进行深入研究。     

京津冀花椰菜产业现状、发展趋势及对策建议

针对我国花椰菜产业不断发展壮大、种植面积不断扩大,尤其是松花菜的种植面积和市场占有率迅速增长的情况,从种植情况、种子研发企业和松花菜栽培情况3大部分展开,介绍了京津冀地区花椰菜产业的发展现状,列举了京津冀地区花椰菜品种品质、育种技术及商品物流方面存在的问题,并提出了发展趋势及应对策略,如加强优质、多抗、适应性强的花椰菜新品种选育,重视花椰菜现代育种技术的创新,加强育种技术的交流与合作,培育龙头企业,加大品牌宣传力度,推进京津冀花椰菜产业发展进程。     

金沙柚果实品质与土壤、叶片、果实矿质养分的相关性分析

[目的]为指导江西省吉安市金沙柚科学施肥提供直接理论依据.[方法]对吉安市23个果园的土壤、叶片、果实矿质养分含量及果实品质进行了测定,并用WPS和SPSS软件对所测数据进行相关性及线性回归方程分析,筛选出影响金沙柚果实品质的主要土壤、叶片和果实矿质养分因子.[结果]结果表明,77.27％的果园土壤中pH值低于5.5,95.45％的果园有机质含量低于15 g/kg;土壤中大量元素氮、磷、钾以缺乏为主,在叶片中三者含量以适量及高量为主,氮和钾还出现了部分果园含量过量情况,果实中三者含量平均值分别为0.80,0.16,1.48 g/kg;果园土壤和叶片中钙和镁含量均以缺乏为主,果实中二者平均值分别为83.49,51.70 mg/kg;果园土壤和叶片中铁、锰和铜含量适宜及适宜以上占比较大,果实中三者平均值分别为2.33,0.28,0.36 mg/kg;锌和硼元素在土壤和叶片中含量情况有所不同,锌元素在土壤以适宜为主而叶片中以缺乏为主,硼元素在土壤中100％缺乏而在叶片中以适宜占比最大,二者在果实中含量平均值为0.60,0.73 mg/kg;土壤和叶片钼元素在约一半果园中存在缺乏情况,果实含量平均值为56.04μg/kg.相关性和线性回归分析结果表明,果皮厚度与叶片钼元素呈负相关,而与果实锰元素呈正相关;可食率与土壤中有效锰呈负相关,与叶片中钙、铜和钼元素呈正相关,与果实中磷元素呈正相关;出汁率与土壤中pH值呈正相关,与土壤有效锰和叶片锰元素呈负相关;可溶性固形物与叶片中铜元素呈正相关;总糖与土壤中有效铁呈负相关,与果实中钙元素呈正相关;可滴定酸与果实中铁元素呈正相关,与果实磷元素呈负相关;Vc与叶片中硼呈负相关.[结论]综上所述,通过增施石灰等碱性物质,提高有机质的施入,可以有效地解决土壤酸化问题并改良土壤结构,也有利于在土壤铁、锰元素高量及过量果园中降低铁和锰元素含量,进一步解决阻碍锌元素吸收的拮抗问题.根据相关性和线性回归方程分析结果推测,土壤的改良因此有助于金沙柚增加可食率和出汁率,增糖降酸以及果皮变薄.另外还需要注意在钙、镁和钼元素缺乏的果园增施相应元素,以及通过控制树势来增大果实对磷元素的吸收能力,也可以对果实生长、可食率和总糖含量的提高以及可滴定酸含量的减少起到一定的作用,从而为金沙柚品质的提升和市场的竞争力的提高打下基础.     

山下黑猪与鲁莱黑猪正反交F1代杂种优势的估计

旨在估计山下黑猪和鲁莱黑猪正反交F₁代杂种优势，筛选出合适的杂交方式，以提高优质肉猪的生产效率，满足人们对于优质猪肉的需求。本研究在山下黑猪（164头）和鲁莱黑猪（69头）及其正（6头山下黑猪♂×25头鲁莱黑猪♀）、反（3头鲁莱黑猪♂×35头山下黑猪♀）交4个群体中测定了生长肥育、体尺外貌（75～110 kg）、繁殖和胴体肉质（90～115 kg）4大类共43个性状，比较了这些性状在群体间的差异，并估计了正反交F₁代的杂种优势。结果表明，山下黑猪的生长肥育和体尺性状较好，鲁莱黑猪的繁殖和肉质性状较好，正反交群体介于它们之间。正交群体的繁殖性能优于反交群体，但生长肥育性能比反交差。由于这4个群体的母猪都是纯种，因此繁殖性状没有表现出明显杂种优势。除膘厚、胸椎数、45 min pH和剪切力无显著的杂种优劣势外，大部分胴体性状和肉质性状有明显的杂种劣势。生长肥育性状的杂种优势在正反交群体中的表现不一致，反交群体表现出显著杂种优势，而正交则无明显的杂种优势。本研究估计了山下黑猪和鲁莱黑猪正反交的杂种优势，为筛选山下黑猪和鲁莱黑猪的最佳杂交方式奠定基础。     

Molecular Characterization of the Von Willebrand Factor Type D Domain of Vitellogenin from Takifugu flavidus

The von Willebrand factor type D (VWD) domain in vitellogenin has recently been found to bind tetrodotoxin. The way in which this protein domain associates with tetrodotoxin and participates in transporting tetrodotoxin in vivo remains unclear. A cDNA fragment of the vitellogenin gene containing the VWD domain from pufferfish (Takifugu flavidus) (TfVWD) was cloned. Using in silico structural and docking analyses of the predicted protein, we determined that key amino acids (namely, Val¹¹⁵, ASP¹¹⁶, Val¹¹⁷, and Lys¹²²) in TfVWD mediate its binding to tetrodotoxin, which was supported by in vitro surface plasmon resonance analysis. Moreover, incubating recombinant rTfVWD together with tetrodotoxin attenuated its toxicity in vivo, further supporting protein–toxin binding and indicating associated toxicity-neutralizing effects. Finally, the expression profiling of TfVWD across different tissues and developmental stages indicated that its distribution patterns mirrored those of tetrodotoxin, suggesting that TfVWD may be involved in tetrodotoxin transport in pufferfish. For the first time, this study reveals the amino acids that mediate the binding of TfVWD to tetrodotoxin and provides a basis for further exploration of the molecular mechanisms underlying the enrichment and transfer of tetrodotoxin in pufferfish.     

宁夏地区荷斯坦牛乳房性状的遗传参数估计和主成分分析

旨在评估宁夏地区荷斯坦牛乳房性状的遗传水平。本研究使用DMU（v6.0）软件的AI-REML模块结合EM算法并配合多性状动物模型对宁夏地区12 415头荷斯坦牛，包括111 735个观察值的9个乳房性状进行遗传参数估计，运用主成分分析法（PCA）探讨构象性状之间的关系。结果表明，宁夏地区荷斯坦牛乳房性状遗传力处于中等偏低水平，乳房深度遗传力值为0.242，乳房质地为0.080，悬韧带为0.183，前乳房附着为0.230，前乳头位置为0.231，前乳头长度为0.173，后乳房高为0.272，后乳房宽为0.378，后乳头位置为0.169。各性状遗传相关范围为-0.277~0.706，表型相关范围为-0.084~0.316。研究共筛选出特征值≥1的4个主成分，占总方差的64.19%，且9个乳房性状在前3个主成分中已全部体现，荷载系数均在0.4以上。本研究通过对宁夏地区奶牛DHI数据的深入挖掘和遗传参数估计，准确地把握了宁夏奶牛群体的结构特征，对于奶牛的选种选配和育种规划具有重要意义。     

叶喷不同水平氮肥对苹果果实淀粉和糖及代谢相关酶活性的影响

以5a生盆栽‘嘎啦’苹果为试材,以喷施纯水为对照(CK),设置3个处理,分别为喷施w=0.1%的尿素(N1),w=0.3%的尿素(N2),w=0.5%的尿素(N3)进行试验,研究叶施不同水平的氮素对苹果果实淀粉、可溶性糖及相关代谢酶活性的影响。结果表明,随着果实发育,果实中果糖、蔗糖、葡萄糖质量分数增加,山梨醇质量分数减少,淀粉质量分数在果实发育初期增加但随着果实的成熟,质量分数减少。氮素可以提高果实单果质量。适量质量分数的氮素有助于淀粉、果糖、蔗糖、葡萄糖的合成,其代谢相关的酶如ADPG焦磷酸化酶(AGPase)、α-淀粉酶、β-淀粉酶、酸性转化酶(AI)、蔗糖合酶(SS-分解方向)、蔗糖磷酸合酶(SPS)和山梨醇脱氢酶(SDH)活性提高;氮素过量时,淀粉、果糖、蔗糖、葡萄糖的合成受到抑制,品质下降,相关酶活性也降低。氮素对中性转化酶(NI)和山梨醇氧化酶(SOX)影响不大。